無塵棚沉降菌監(jiān)測規(guī)范操作程序

1目地：精確監(jiān)測無塵棚潔凈棚沉降菌落數(shù)，保證生產(chǎn)制造及檢測棚域空氣中的微生物菌種總數(shù)符合規(guī)定，確保產(chǎn)品品質(zhì)。

2范疇：適用本企業(yè)潔凈棚。

3責(zé)任者：生測組沉降菌監(jiān)測工作人員按此規(guī)范實(shí)行。

4變動(dòng)緣故：進(jìn)一步完善操作程序，使之更為標(biāo)準(zhǔn)，有效。

5內(nèi)容：

5.1取樣容器的沖洗與消毒殺菌

5.1.1首先用冷水將培養(yǎng)皿清洗多次，再用適合的刷子,清洗液不斷清洗再用生活用水清洗至沒有氣泡，最終用純水系統(tǒng)清洗晾曬。

5.1.2將培養(yǎng)皿放進(jìn)不銹鋼板培養(yǎng)皿筒里再放進(jìn)電加熱控溫鼓風(fēng)干燥箱250℃干熱滅菌器一小時(shí)。 

5.2儀器設(shè)備與機(jī)器設(shè)備

5.2.1潔凈臺(tái)，電加熱控溫鼓風(fēng)干燥箱、恒溫培養(yǎng)箱、不銹鋼板培養(yǎng)皿筒 ， 培養(yǎng)皿，酒精噴燈。

5.2.2培養(yǎng)液：營養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)液，玫紅鈉瓊脂培養(yǎng)液

5.3培養(yǎng)基培養(yǎng)皿的制取

5.3.1將培養(yǎng)液加溫融化，冷至45℃時(shí)，在無菌檢測情況下實(shí)際操作，將培養(yǎng)液引入培養(yǎng)皿，每皿約15ml～18ml。

5.3.2待瓊脂凝結(jié)后，將培養(yǎng)液培養(yǎng)皿倒放置30～35℃和23～28.℃恒溫培養(yǎng)箱中各自塑造48鐘頭和72小時(shí)保證培養(yǎng)液培養(yǎng)皿上無菌檢測時(shí)即可應(yīng)用，將制取好的培養(yǎng)液培養(yǎng)皿在4～8℃的條件中儲(chǔ)放。

5.4取樣方式：將已制取好的培養(yǎng)皿置放在預(yù)先確定的抽樣點(diǎn)，開啟培養(yǎng)皿蓋使培養(yǎng)液表層曝露要求時(shí)間，再將培養(yǎng)皿蓋緊蓋。

5.5塑造

5.5.1所有取樣完畢，將培養(yǎng)皿顛倒`

5.5.2各自放進(jìn)30～35℃, 23～28℃恒溫培養(yǎng)箱中塑造48鐘頭，72小時(shí)。

5.5.3每次培養(yǎng)液，做對(duì)比塑造，每次培養(yǎng)皿的數(shù)量不能低于2個(gè)。

5.6取樣點(diǎn)數(shù)量及至少培養(yǎng)皿數(shù)

5.6.1取樣點(diǎn)數(shù)量

5.6.2每十平方米所需培養(yǎng)皿數(shù)

5.6.3取樣點(diǎn)的布局

5.6.3.1工作中棚測試用例部位離路面0.8～1.5m（稍高于工作臺(tái)面）。

5.6.3.2可在主要設(shè)備或重要工作中主題活動(dòng)范疇處提升測量點(diǎn)，取樣點(diǎn)的布局勻稱，防止取樣點(diǎn)某部分棚域過度集中化某部分棚域過度稀少。

5.7數(shù)值：用記數(shù)方式得到每一個(gè)培養(yǎng)皿的菌體數(shù)。每一個(gè)測量點(diǎn)的沉降菌的均值菌體數(shù)用計(jì)算公式。          

     均值菌體數(shù)M=（M1 M2 M3 … Mn）/   n

式中，M――均值菌體數(shù)；

      M1――1號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)；

      M2――2號(hào)培養(yǎng)皿菌體數(shù)；

      Mn――n號(hào)培養(yǎng)皿菌落數(shù)；

      N――培養(yǎng)皿數(shù)量；

5.8生產(chǎn)制造棚檢驗(yàn)

5.8.1取樣情況和時(shí)間

5.8.1.1靜態(tài)數(shù)據(jù)：30分鐘；動(dòng)態(tài)性：生產(chǎn)過程24小時(shí)檢驗(yàn)，每4鐘頭換一次培養(yǎng)皿。

5.9 監(jiān)測次數(shù)：

5.9.1生產(chǎn)制造棚在商品生產(chǎn)制造期內(nèi)，依據(jù)潔凈棚潔凈室等級(jí)各自開展監(jiān)測。

5.9.1.1千級(jí)及萬級(jí)棚，各棚每日應(yīng)監(jiān)測，但取樣量及采樣數(shù)量可以降低

5.9.1.2表層環(huán)境污染及人體細(xì)菌檢測在無菌檢測藥物生產(chǎn)制造期內(nèi)每日應(yīng)開展。

5.9.1.3十萬級(jí)棚各棚應(yīng)每星期監(jiān)測一次。

5.9.1.4三十萬級(jí)棚各棚應(yīng)每兩個(gè)星期監(jiān)測一次。

5.10產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)部解決各棚按時(shí)抽樣檢驗(yàn)：靜態(tài)數(shù)據(jù)30分鐘；動(dòng)態(tài)性4鐘頭。

5.11棚在停工后產(chǎn)蛋前的監(jiān)測按請(qǐng)驗(yàn)單立即開展。

5.12潔凈度等級(jí)等級(jí)及規(guī)范

注：黃曲霉菌不可驗(yàn)出

5.1.3假如檢測結(jié)果所有合乎標(biāo)準(zhǔn)，即開達(dá)標(biāo)匯報(bào)。如果有某些棚間不符合標(biāo)準(zhǔn)，將開不合格報(bào)告，規(guī)定馬上采取措施，直至合格。